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          酶聯給大家講解如何防止細胞老化
          更新時間:2023-12-26   點擊次數:303次

          大家在養細胞的時候,想必大家也一定遇到過細胞狀態差這種情況,但是細胞狀態差,有很多種原因造成。細胞狀態很差,常常出現的現象是:細胞邊緣不清晰、細胞不飽滿、折光性差、背景比較臟、黑點很多、細胞碎片多(細胞凋亡后的細胞碎片)、單個細胞內有空泡(凋亡)且空泡比較多;如果細胞出現老化,也就是細胞比較扁平、增殖減緩、細胞核體積增大、細胞突觸變多,此時觀察到的細胞狀態也是不正常的。所以,除了考慮血清和細菌污染的問題,細胞老化也不容忽視~

          細胞老化的征兆:

          一、細胞周期阻滯

          長期的細胞周期阻滯是老化細胞的基本特征,也是體外鑒定細胞老化的指標。為了檢查細胞是否躍出了細胞周期,人們通常檢測增殖指示分子Ki-67的表達豐度;或者通過將與胸腺嘧啶相似的溴脫氧尿mi啶(Bromodeoxyuridine,BrdU)摻入到細胞培養基中,觀察是否有新的DNA合成。細胞老化主要表現為G1期阻滯,個別情況下也可伴隨G2/M期周期阻滯,或直接由G2/M期阻滯誘發形成。

          細胞

          二、細胞形態改變

          雖然由于細胞周期的中斷和DNA復制的停止,老化細胞內的DNA含量與正常細胞類似,但 RNA與蛋白質豐度均比正常細胞要明顯升高。這是因為,盡管細胞進入老化階段后蛋白質的整體合成速率降低,但是蛋白質的降解體系受到更加明顯的抑制,導致蛋白質在細胞內持續堆積。但,由于不同組織來源的細胞,其形態本就各不相同,因此,目前還并無客觀的、統一的標準從細胞形態判斷并定義老化細胞。換句話說,目前并不能直接根據細胞的形態去判斷是否老化細胞。

          總結:

          研究表明,衰老細胞的細胞核、細胞質和細胞膜等均有明顯的變化:

          ①細胞內水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢;

          ②細胞內酶的活性降低;

          ③細胞內的色素會積累;

          ④細胞內呼吸速度減慢,細胞核體積增大,核膜內折,染色質收縮,顏色加深.線粒體數量減少,體積增大;

          ⑤細胞膜通透性功能改變,使物質運輸功能降低.

          如何防止細胞老化:

          1. 不要等細胞長得太滿才傳代。細胞太密會導致細胞狀態下降,產生細胞接觸性抑制。

          2. 細胞不要消化過度。采用醫蛋白酶消化細胞,會造成細胞表面一定程度的細胞損傷。

          3. 最重要的是使用優質的血清和培養基:干細胞對培養基中的內毒素非常敏感。除了要留意基礎培養基的內毒素外,也要留意血清的內毒素。如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易老化或死亡,導致細胞“亞健康"狀態,導致實驗受到影響。很多使用者,在血清在試用前,就會通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

          4. 在開始養細胞并傳代時,也要特別注意凍存細胞,以保持細胞有種子庫存在,可以有效避免細胞損傷。


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